喉癌组织中LCRG1基因启动子的克隆、突变和甲基化检测
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【作 者】:
【摘 要】目的观察喉癌候选抑瘤基因(laryngeal carcinoma related gene 1, LCRG1)启动子的功能。方法(1)通过5′缺失突变、瞬时转染与荧光素酶报告基因活性检测,进一步分析与LCRG1基因表达调控有关的最小启动子区域;(2)通过PCR单链构象多态性(PCRsinglestrand conformation polymorphism, PCRSSCP)技术检测40例喉癌组织中LCRG1基因启动子突变;(3)应用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR, MSP)技术检测40例喉癌组织中LCRG1基因启动子甲基化状态;(4)采用RTPCR技术检测40例喉癌组织中LCRG1基因的表达。结果(1)LCRG1基因最小启动子片段位于转录起始位点上游-169- -57位点;(2)喉癌组织中LCRG1基因启动子无突变;(3)40例喉癌组织中有5.00% LCRG1基因启动子甲基化改变;(4)RTPCR检测显示40%(16/40)喉癌组织中LCRG1基因表达下调。结论LCRG1基因最小启动子位于转录起始位点上游-169- -57位点的DNA片段;LCRG1基因启动子甲基化部分改变可能参与该基因的表达调控。
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