siRNA干扰缺氧诱导因子-2α对乳腺癌细胞增殖能力的影响
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【摘 要】目的探讨缺氧诱导因子-2α(hypoxia.induciblefactors-2α,HIF-2α)siRNA对乳腺癌细胞MCF-7增殖能力的影响及相关机制。方法采用CoCl2处理细胞,建立细胞缺氧模型,应用RNA干扰技术沉默MCF-7细胞中HIF-2α的表达;运用RT—PCR技术检测转染后MCF-7细胞中HIF-2αmRNA的表达;绘制细胞生长曲线,观察细胞生长速度和倍增时间;通过流式细胞术观察细胞周期分布的改变;采用RT—PCR技术检测增殖相关基因的表达。结果细胞缺氧模型建立成功。RNA干扰结果显示:缺氧+siRNA组HIF-2αmRNA的表达与单纯缺氧组相比明显降低(P〈0.05);细胞生长曲线结果显示:缺氧+siRNA组与单纯缺氧组相比,细胞生长速度明显减慢,倍增时间显著延长(P均〈0.05);细胞周期结果显示:缺氧+siRNA组与单纯缺氧组相比,S期和G2/M期细胞比例显著减少(P〈0.05);RT—PCR结果显示:缺氧+siRNA组与单纯缺氧组相比,p21基因表达上调(P〈0.05),CyclinB基因表达下调(P〈0.05)。结论HIF.2ixsiRNA可抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖能力,可能与p21基因表达上调、CyclinB基因表达下调有关。